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一提起蛋白质浓缩、更换缓冲液，我们都会想起超滤。这是一种我们都很熟悉的膜分离技术。它可用来分离溶液中极小的颗粒和溶解的分子。这种方法的最大特点是操作简便，只需要浓缩离心管和离心机，即可圆满完成我们的任务。

与层析、透析等方法相比，超滤对被处理的分子更加温和。它不需要有机萃取，就不会导致蛋白变性。这种方法非常高效，可同时浓缩和纯化分子。操作可在低温（比如冷库）下进行。另外，快速、便宜，也是许多人青睐它的原因。

浓缩离心管的操作很简单。选择适当的浓缩离心管，加入待处理的样本，按照离心管的指示进行离心操作，最后回收截留的样本。在离心力的作用下，溶液中的小分子溶质和溶剂透过超滤膜，被收集在滤过液收集瓶中，而大分子溶质被超滤膜截留在浓缩离心管中。这种分离的主要依据是分子大小，但分子形状和电荷等其他因素也会有影响。

一般来说，超滤的回收率可达90%以上。样本损失大多是由于滤膜表面和容器表面的非特异性吸附引起的。因此，选择口碑好、高品质的浓缩离心管非常重要。颇尔作为全球领先的过滤企业，提供了多种浓缩离心管，可对50 μl到60 ml的样本进行高效的浓缩和脱盐。它配备了Omega（改良的聚醚砜）膜，确保低的非特异性吸附和高的回收率。当然，这个的前提是你选对了浓缩离心管。

如何选择浓缩离心管

1.按体积

颇尔实验室提供了4个系列的浓缩离心管，适合处理不同体积的样本。你可以根据你的样本量来选择。

不过，如果样本浓度低体积大，可以选择较小容积的浓缩离心管多次重复加样离心。

产品	样本体积
Nanosep® 浓缩离心管	< 0.5 mL
Microsep™ Advance 浓缩离心管	0.5-5.0 mL
Macrosep® Advance 浓缩离心管	5-20 mL
Jumbosep™ 浓缩离心管	20-60 mL

2. 选择适当的截留分子量

（MWCO）

一旦样本体积确定，下一步就是选择适当的MWCO。对于蛋白质而言，建议所选滤膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常，截留孔径越小，流速越慢，但截留比例更大。因此，如果流速是主要的考虑因素，建议选择MWCO为1/3的滤膜；如果重点考虑截留比例，那么最好选择更致密的膜。

友情提示一下，超滤膜对分子的截留是由多个因素决定的。在截留分子量之外，你还有必要考虑分子形状、电荷、样本浓度、样本组成及操作条件。也许，线性的DNA分子溜走了，而球状的分子却被保留下来。总之，根据下表来选择MWCO就基本没错了。为了防止大家拿错管子，颇尔实验室还贴心地将不同MWCO的浓缩离心管设置成不同的颜色，以方便识别。

核酸应用的MWCO选择

蛋白应用的MWCO选择

病毒应用的MWCO选择

对于1L样品处理，切向流超滤系统会助力您的研究。颇尔实验室Minimate EVO 切向流超滤系统是设计用来进行高度可靠的1L样品换液或者浓缩。

新的切向流超滤系统增加了下游的压力表来使计算跨膜压力成为可能, 允许更大的用户控制和验证. 除此之外，Minimate EVO 切向流系统升级了磁力搅拌功能，更加坚固的管路和连接，更加容易安装和运行。

超滤技术的应用

核酸应用的MWCO选择

这是大家都很熟悉的应用。超滤可很方便地浓缩经过稀释的蛋白质或DNA/RNA样本。它很温和，不会打断长达100 kb的DNA，也不会导致蛋白酶活的损失，同时也很高效，回收率通常高于90%。通过膜预处理（钝化）可以提高低浓度蛋白的浓缩效率。稀释蛋白质溶液的浓缩是一种广泛使用的应用. 稀释 (<10 µg/mL) 蛋白质溶液的回收率通常不是定量的.在浓缩稀蛋白质溶液之前对设备进行预处理（钝化）可以提高回收率.

脱盐和缓冲液交换

超滤带来了一种方便而高效的方法，可去除和交换溶液中的盐、去除变性剂、分离复合分子、去除低分子量组分，或者快速改变离子或者pH环境。比如在用两种或两种以上的限制性内切酶进行酶切时，有时找不到通用的酶切缓冲液，就可以借助浓缩离心管，更换缓冲液。

组分分离

当然，超滤无法完全分离两种分子量接近的分子。为了有效分离，待分离分子的分子量至少要相差一个数量级（10X）。对于PCR产物的纯化和回收，超滤就很适合。PCR反应混合物里含有多种盐、游离的核酸、甘油、蛋白和引物，因此大多数的下游应用都要求对PCR产物进行某种纯化。超滤的方法快速，操作少，产率高，也不损伤DNA。

最后提醒一下，对于高通量超滤应用，颇尔实验室还提供各种微孔滤板助力您的研究。为您的科研保驾护航。欢迎联系颇尔实验室索取免费样品和下载技术资料。

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